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技术干货—外泌体鉴定方法

发布时间: 2026-01-04 浏览量:0
外泌体鉴定与检测方法专题 | 天根生物
外泌体鉴定方法 - TEM

透射电子显微镜(TEM):

✔ 外泌体透射电镜分辨率为0.1-0.2nm,适合外泌体双层囊膜超微结构观察;

✔ 外泌体在电镜下多为茶托形或一侧凹陷半球形,符合特征的微粒可初步认为是外泌体。

外泌体鉴定方法 - NTA

粒径检测(NTA):

粒径范围:外泌体的直径约为30nm-150nm,可直接测量所提取的微粒粒径来判断是否符合这一标准。

技术优势:NTA具有易用、快速、稳健、准确等优点,可对10-2000nm范围内的纳米颗粒快速实时动态检测,保证外泌体的原始状态。

检测指标:通过测量粒径、散射光强、浓度等,对提取外泌体粒径大小及数量进行统计及初步质量评估。

外泌体鉴定方法 - WB

标志物鉴定(WB):

✔ 对符合以上两条标准的微粒进行蛋白质印记检测,测定外泌体的表面标志物。

✔ 典型外泌体表面标志物CD9、CD63、CD81等,常见外泌体表面标志物有Alix、Hsp70等。

✔ 对于特定细胞分泌的外泌体可能含有特殊的标志物,如需要也可对特殊标志物进行测定。

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03 结果可靠

分离的外泌体纯度高,完整性好,提取的miRNA满足下游各类检测实验

外泌体提取方法对比:经典超离法 vs 磁珠法新技术
经典超离法

差速超速离心法

流程:300xg → 2000xg → 10000xg → 100000xg 梯度离心

优点:纯度尚可,是外泌体提取的经典方法
缺点:耗时久(约4-6小时)、得率有限、需超速离心机
磁珠法新技术

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