透射电子显微镜(TEM):
✔ 外泌体透射电镜分辨率为0.1-0.2nm,适合外泌体双层囊膜超微结构观察;
✔ 外泌体在电镜下多为茶托形或一侧凹陷半球形,符合特征的微粒可初步认为是外泌体。
✔ 外泌体透射电镜分辨率为0.1-0.2nm,适合外泌体双层囊膜超微结构观察;
✔ 外泌体在电镜下多为茶托形或一侧凹陷半球形,符合特征的微粒可初步认为是外泌体。
粒径范围:外泌体的直径约为30nm-150nm,可直接测量所提取的微粒粒径来判断是否符合这一标准。
技术优势:NTA具有易用、快速、稳健、准确等优点,可对10-2000nm范围内的纳米颗粒快速实时动态检测,保证外泌体的原始状态。
检测指标:通过测量粒径、散射光强、浓度等,对提取外泌体粒径大小及数量进行统计及初步质量评估。
✔ 对符合以上两条标准的微粒进行蛋白质印记检测,测定外泌体的表面标志物。
✔ 典型外泌体表面标志物CD9、CD63、CD81等,常见外泌体表面标志物有Alix、Hsp70等。
✔ 对于特定细胞分泌的外泌体可能含有特殊的标志物,如需要也可对特殊标志物进行测定。
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可从血浆、血清、尿液、唾液、细胞培养液等样本中富集外泌体
分离的外泌体纯度高,完整性好,提取的miRNA满足下游各类检测实验
流程:300xg → 2000xg → 10000xg → 100000xg 梯度离心
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